產品介紹
細胞名稱:人髓樣甲狀腺腫瘤細胞
形態特性:上皮細胞
生長特性:貼壁生長
特征特性: TT細胞由77歲女性甲狀腺髓質癌患者的穿刺活檢樣本中建立。 TT細胞持續產生高水平的降血鈣素和CEA。 在更換培養基后24小時和72小時在培養基中檢測到的免疫活性的降血鈣素濃度分別為3900 pg/百萬細胞和7700 pg/百萬細胞。 72小時后CEA積累濃度超過27 ng/百萬細胞。
培養條件: F12K 優質胎牛血清,10%
傳代方法:消化5-10分鐘。1:
2。一周后可再傳。
傳代情況: P(31+5)
凍存條件:完全培養基+8%DMSO
細胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細胞培養的操作步驟:
1.人髓樣甲狀腺腫瘤細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮?;靹蚣毎麜r盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。