產品介紹
細胞名稱:人非小細胞肺癌細胞
形態特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:該細胞源于一位51歲患有非小細胞肺癌黑人男性患者的治療前的腫瘤組織,表達C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs;該細胞攜帶K-ras 12突變;p53基因246位密碼子突變ATC→ATG;表達PDGF A和B鏈的異源mRNA;表達TGFα、TGFβ和EGFR;角蛋白 5、8和18陽性,波形蛋白陽性,神經絲蛋白陰性,左旋多巴脫氫酶陰性;據報道,在軟瓊脂中該細胞形成克隆
傳代方法: 1:
3傳代;3~4天1次。
傳代情況:
凍存條件:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
產品名稱 | 人非小細胞肺癌細胞 |
英文簡稱 | NCI-H23 |
狀態 | 貼壁 |
細胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細胞培養的操作步驟:
1.人非小細胞肺癌細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮?;靹蚣毎麜r盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。